凝膠色譜的原理是什么

凝膠色譜,又稱為分子排阻色譜,其分離物質(zhì)的原理為分子篩原理,且多用于分離有機(jī)大分子化合物,如蛋白質(zhì)、多肽、多糖等.

分子篩效應(yīng)：一個(gè)含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經(jīng)凝膠色譜柱時(shí),各分子在柱內(nèi)同時(shí)進(jìn)行著兩種不同的運(yùn)動(dòng),垂直向下的移動(dòng)和無(wú)定向的擴(kuò)散運(yùn)動(dòng).大分子物質(zhì)由于直徑較大,不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時(shí)向下移動(dòng)的速度較快.小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴(kuò)散外,還可以進(jìn)入凝膠顆粒的微孔中,即進(jìn)入凝膠相內(nèi),在向下移動(dòng)的過(guò)程中,從一個(gè)凝膠內(nèi)擴(kuò)散到顆粒間隙后再進(jìn)入另一凝膠顆粒,如此不斷地進(jìn)入和擴(kuò)散,小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì),從而使樣品中分子大的先流出色譜柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出,這種現(xiàn)象叫分子篩效應(yīng).具有多孔的凝膠就是分子篩.